Актуальные инфекционные болезни свиней

Капустин А.В., Лаишевцев А.И.

Гемофилез свиней (гемофилезный полисерозит, болезнь Глёссера) — инфекционное заболевание, сопровождающееся развитием полисерозитов, полиартритов и менингитов. Инфекции наиболее подвержены поросята в отъемный период до 12 недель жизни. Болезнь распространена во всем мире, особенно в странах с интенсивным свиноводством.

Этиология. Впервые инфекция была описана К. Глёссером в 1910 г., который обнаружил наличие некультивируемых на тот момент бактерий в экссудате из грудной полости поросят, погибших от заболевания, сопровождавшегося фибринозным полисерозитом. Однако изоляция возбудителя ввиду его требовательности к питательным средам стала возможна намного позже. Haemophilus parasuis был выделен и идентифицирован лишь в 1922 г. Р. Эрлихом. Роль в развитии заболевания была позже подтверждена несколькими авторами, сумевшими воспроизвести болезнь путем заражения поросят чистыми культурами возбудителя.

H. parasuis относится к роду Haemophilus семейства Pasteurellaceae. Это мелкие (0,5×0,2–0,3 мкм) полиморфные грамотрицательные капсулообразующие палочки, или кокко-палочки, в мазках из патологического материала могут располагаться цепочками, в питательных средах — в виде нитей. Микроорганизм высокотребователен к питательным средам и растет только при наличии в составе питательной среды V (никотинамид-аденин-динуклеотид, НАД) и X (гемин) факторов, поэтому культивирование проводят на шоколадном агаре или кровяном, обогащенном дрожжевым экстрактом в 5–10%-ной атмосфере CO2. Микроорганизм обладает подвижностью, является факультативным анаэробом с вариабельными результатами реакции в тестах на каталазу и оксидазу. Не растет на агаре MacConkey.

При культивировании в 5–10%-ной атмосфере CO2 при 37°С в течение 36–48 часов H. parasuis образуют небольшие прозрачные колонии (рис. 1).

Рис. 1. Колонии Haemophilus parasuis вблизи бактериальной кормилки (негемолитический штамм Staphylococcus spp.)

Классификация H. parasuis представляет особый интерес для диагностики и контроля инфекции, поскольку важно дифференцировать невирулентные и патогенные штаммы. Первоначально классификация H. parasuis была основана на антигенных свойствах, определяемых в реакции диффузной преципитации в геле (РДП) с использованием термостабильных антигенов и кроличьих поликлональных антисывороток. Таким образом, изоляты, содержащие сходные антигены, были разделены на 15 сероваров, хотя значительная часть штаммов, в том числе высоковирулентных, при этом осталась несеротипирована. Стоит отметить, что четкой связи между серотипом и вирулентностью у H. parasuis нет.

Факторы вирулентности H. parasuis изучены достаточно слабо, поэтому для окончательного доказательства вирулентности требуется проведение биологической пробы на лабораторных и целевых животных. Известно, что H. parasuis вырабатывает капсулярные полисахариды, липо-олигосахариды и белки наружной мембраны, но подробная информация об их точной патогенной роли не определена окончательно.

В настоящее время для классификации изолятов H. parasuis широко используются молекулярно-биологические методы, в частности генотипирование. Данный метод также подтверждает высокую геномную гетерогенность возбудителя, в том числе демонстрирует возможность индикации нескольких штаммов H. parasuis у одного животного или на одном свиноводческом предприятии. Идентификация генов вирулентности в H. parasuis представляет практический интерес для дифференциации штаммов с высоким патогенным потенциалом и использовании их для усовершенствования вакцин.

Эпизоотология. H. parasuis является комменсалом верхних дыхательных путей домашних и диких свиней. Поросята заражаются аэрогенным путем практически сразу после рождения от свиноматок, но наличие колостральных антител предотвращает развитие клинических признаков инфекции у молодняка. В связи с этим болезнь Глёссера обычно возникает спорадически у поросят в старшем возрасте, а именно среди животных от 3 до 12 недель жизни, при условии наличия первичной вирусной инфекции, приводящей к иммуносупрессии, или под воздействием неблагоприятных факторов окружающей среды [12]. Активный иммунитет к H. parasuis обычно фиксируется в возрасте 7–8 недель.

Возбудитель преимущественно обнаруживается в назальных смывах поросят в возрасте до 6 месяцев, что позволяет использовать данный возраст для определения носительства, благополучия комплекса или диагностики инфекционной патологии, в том числе протекающей в сочетанном виде. Часто от животных одного стада можно выделить несколько сероваров возбудителя, из которых лишь один или два имеют этиологическое значение.

Заболеваемость и смертность от гемофилеза варьирует в пределах 5–10% на неблагополучных фермах, но может достигать 75% и более при первичном попадании вирулентного возбудителя в изначально благополучное стадо [14]. Распространенность заболевания также в значительной степени зависит от сопутствующих факторов: стрессоров, вирусных инфекций, нарушения зооветеринарных условий, раннего отъема и др.

Патогенез. Попадая в организм животного, клетки H. parasuis колонизируют слизистые оболочки носовых ходов, вызывая развитие гнойного ринита и дегенерацию эпителиальных клеток [2]. Дальнейшее распространение возбудителя способствует колонизации легочных тканей, где, благодаря способности образовывать капсулу, вирулентные штаммы преодолевают фагоцитарную активность альвеолярных макрофагов. Затем развитие апоптоза, а также образование интерлеконов позволяет возбудителю проникать через эндотелиальные клетки в кровь, где он преодолевает бактерицидный эффект комплемента крови. Достигнув внутренних органов, H. parasuis размножается на серозных поверхностях, вызывая скопление экссудата, транссудата и отложения фибрина.

Тяжесть заболевания зависит от вирулентности штаммов H. parasuis, а также от общей резистентности организма животных. Гемофилез может протекать как первичная инфекция, но чаще, при наличии сопутствующих вирусных болезней, H. parasuis играет важную роль вторичного агента; особенно четко выражена связь с вирусом респираторно-репродуктивного синдрома (PRRSV), цирковирусом 2 типа (PCV2) и вирусом гриппа типа A. Среди бактериальных патогенов стоит отметить сочетанную инфекцию с бордателлиозом.

Клинические признаки. Проявления инфекции наблюдаются в основном у 4–8-недельных поросят, хотя возраст может варьировать в зависимости от уровня колострального иммунитета. Также описаны случаи заболевания взрослых свиней, но, как правило, это происходит при введении в неблагополучное поголовье интактных животных. Инкубационный период колеблется от 2 до 5 дней, что зависит от вирулентности штамма и резистентности организма животного.

При сверхострой форме болезни может наблюдаться внезапная гибель поросят без развития характерных клинических признаков. При острой форме болезни регистрируют высокую температуру (41,5°C), кашель, абдоминальное дыхание, воспаление суставов и поражение центральной нервной системы, что проявляется в основном судорогами.

У животных с острым или подострым течением болезни наблюдают сходные признаки, но менее выраженные. Такие поросята, как правило, выживают, но болезнь переходит в хроническую форму. Типичные клинические признаки в данном случае отсутствуют, но у поросят снижаются темпы роста, развивается хромота, при движении наблюдаются одышка и кашель, а также поросенок обрастает длинной грубой щетиной. В литературе описаны случаи болезни, клинически не характерные для гемофилеза, но, вероятно, связанные с данной инфекцией, такие как панникулит ушей у поросят на откорме или острый миозит жевательных мышц у свинок [4].

Патологоанатомические признаки. При сверхострой форме болезни поросята погибают без развития клинических признаков заболевания, при этом вскрытие позволяет обнаружить лишь многочисленные точечные кровоизлияния в тканях и незначительное количество жидкости в грудной и брюшной полостях без примесей фибрина.

Острая форма гемофилеза характеризуется развитием фибринозного полисерозита, полиартритов и менингита. Фибринозный налёт можно наблюдать на плевре, перикарде, брюшине, мозговых оболочках, кроме того, отмечается увеличение количества жидкости в грудной полости [7, 10]. Плевриты, как правило, сопровождаются гнойно-катаральной бронхопневмонией. При неврологической форме характерные патологоанатомические признаки могут отсутствовать. У хронически больных поросят обычно наблюдают фибринозное воспаление перикарда, плевры и/или брюшины, а также хронический артрит [3, 6].

Диагноз. При постановке диагноза на гемофилез обращают внимание на эпизоотические данные, клинико-морфологическое проявление инфекционного процесса, но из-за того, что признаки данной инфекции имеют схожесть с рядом других инфекционных патологий, окончательный диагноз устанавливается исключительно на основании лабораторно-диагностических исследований.

При дифференциальной диагностике необходимо исключить эшерихиоз, микоплазмоз, вызванный М. hyorhinis, стрептококкоз; кроме того, причиной полиартритов с развитием хромоты могут быть E. rhusiopathiae, M. hyosynoviae, хотя при этом отсутствует массовость поражения животных [5].

Поскольку H. parasuis является комменсалом верхних дыхательных путей у здоровых свиней, изоляцию культур из материала носовых ходов или трахеи не стоит рассматривать как полноценное подтверждение диагноза. Важное значение имеет обнаружение факторов вирулентности или подтверждение вирулентности культур путем заражения лабораторных животных с развитием заболевания и гибели. Как правило, к таким культурам относят изоляты H. parasuis, выделенные из фибринозного экссудата и пораженных внутренних органов.

Изоляция возбудителя представляет определенные трудности, поскольку он слабоустойчив в окружающей среде и требует высокопитательных сред, обогащенных факторами роста. С целью повышения вероятности выделения возбудителя целесообразно пользоваться для отбора проб и передачи их в лабораторию транспортировочными средами Аймса и соблюдать температурный режим (4–6°С).

Помимо изоляции возбудителя бактериологическими методами, H. parasuis может быть детектирован непосредственно в поражениях тканей иммуногистохимией или ПЦР [8]. ПЦР в режиме реального времени позволяет обнаружить 0,83–9,50 колониеобразующих единиц (КОЕ), высокочувствительна и специфична в сравнении с другими методами, например упомянутой ранее РДП. Однако ее недостатком является то, что могут быть выявлены нежизнеспособные клетки и невозможно получить данные по чувствительности изолятов к антибактериальным препаратам. Методы молекулярной биологии также можно использовать для дифференцировки между вирулентными и невирулентными изолятами. Важное диагностическое значение также имеет обнаружение антител к H. parasuis методом ИФА [13].

Для бактериологического исследования на гемофилёз образцы клинического или патологоанатомического материала передают в лабораторию незамедлительно после отбора. Для изоляции используют либо шоколадный агар, либо агар с кровью с подсевом бактериальной кормилки, как правило, S. aureus или иного вида бактерий, которые продуцируют НАД факторы. Инкубирование должно происходить в атмосфере, содержащей 5-10% углекислого газа, при 37°С в течение 2–3 дней. Важно постоянно отслеживать рост H. parasuis на средах, поскольку при первичных посевах существует высокий риск зарастания колоний более активными контаминантами.